光谱学与光谱分析
岩藻多糖酶的FTIR光谱研究
马爽1,2 ,肖厚荣2 ,吴茜茜2 ,潘仁瑞2 ,蔡敬民1,2*
1. 安徽农业大学生命科学学院，安徽 合肥 230036
Investigation of Fucoidanase by FTIR Spectra
MA Shuang1,2 ,XIAO Hou-rong2 ,WU Qian-qian2 ,PAN Ren-rui2 ,CAI Jing-min1,2*
1. College of Life Science,Anhui Agricultural University,Hefei 230036，China
摘要 ： 通过海洋真菌LD8固态发酵获得岩藻多糖的粗蛋白，并进一步采用柠檬酸缓冲液浸提、丙酮沉淀和葡聚糖凝胶G-100层析，分离纯化至单一组分；利用傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)及曲线拟合等技术研究了岩藻多糖酶的二级结构组成，增强因子为2.2，半峰宽为20.2 cm-1 ；为提高分析测定的准确性，对酰胺Ⅰ带与酰胺Ⅲ带分别进行拟合归属。结果表明：根据酰胺Ⅰ带所获得的二级结构，α -螺旋占11.5%，β -折叠为58.6%,无规卷曲14.5%,β -转角15.9%；酰胺Ⅲ带所得二级结构，α -螺旋含12%，β -折叠含57.3%,无规卷曲含14.5%,β -转角含16.3%。因此可见，酰胺Ⅰ带与酰胺Ⅲ带所对二级结构的分析是十分吻合的。在室温下，岩藻多糖酶的二级结构以β -折叠的含量占优势，约占58%，β -转角和无规卷曲次之，各占15%左右，α -螺旋含量较低，仅占12%。
关键词 ：岩藻多糖酶;傅里叶变换红外光谱;二级结构
Abstract ：Fucoidanase was isolated and purified from marine fungus LD8 by solid state fermentation,extraction with citric acid buffer,acetone precipitatation and column chromatography on Sephadex G-100. A single band on PAGE shows that pretty pure fucoidanase has been obtained. FT-IR spectra and its derivation，self-deconvolution and curve-fitting methods were used to analyze the secondary structure of the fucoidanase. Composite bands of the amide Ⅰ and amide Ⅲ were studied by using Fourier self-deconvolution (FSD) with an enhancement factor of K =2.2 and a half width of 20.2 cm-1 . The relative average fractions of α-helix，β -sheet，random coil，β -turn are 11.5%,58.6%,14.5% and 15.9%,respectively,according to amide Ⅰ region,while the content of α-helix is 12%，β -sheet 57.3%，random coil 14.5%，and β -turn 16.3% on amide Ⅲ region. In other words,both the conclusions were exactly consistent. All the above results show that β -sheet was the dominant component，which is about 58%，and that β -turn is about 15%,random coil 15%，and α-helix 12% at room temperature.
Key words ：Fucoidanase;FTIR;Secondary structure
收稿日期: 2006-11-10
修订日期: 2007-02-20
通讯作者:
蔡敬民
E-mail: caijingmin@hfuu.edu.cn
引用本文:
马爽1,2 ,肖厚荣2 ,吴茜茜2 ,潘仁瑞2 ,蔡敬民1,2* . 岩藻多糖酶的FTIR光谱研究[J]. 光谱学与光谱分析, 2008, 28(03): 590-593.
1,2 ,XIAO Hou-rong2 ,WU Qian-qian2 ,PAN Ren-rui2 ,CAI Jing-min1,2* . Investigation of Fucoidanase by FTIR Spectra. SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS, 2008, 28(03): 590-593.
链接本文:
https://www.gpxygpfx.com/CN/10.3964/j.issn.1000-0593.2008.03.012
或
https://www.gpxygpfx.com/CN/Y2008/V28/I03/590
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