番茄红素(购自上海源叶生物科技有限公司); 石油醚、 丙酮、 甲醇、 二氯甲烷均为国产分析纯 ; TU-1901型双光束可见-紫外分光光度计; CT15RT型高速台式冷冻离心机; 海天牌番茄酱。

1.2.1 不同溶剂对番茄红素吸收的影响

取3个小烧杯, 称取3份番茄红素标准品1 mg, 倒入小烧杯中, 加入6%的二氯甲烷助溶, 将溶解后的番茄红素分别倒入3个50 mL的容量瓶中, 用石油醚、 丙酮、 甲醇三种溶剂分别定容至刻度, 制成番茄红素标准溶液。 用分光光度计在400~600 nm范围内扫描图谱。

1.2.2 番茄红素不同溶剂中标准曲线的制作

吸取番茄红素标准溶液0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0 μ g· mL^-1, 然后用石油醚定容至50 mL, 注入1 cm厚的比色皿中, 以石油醚做参比液, 在最大吸收波长474 nm处测定其吸光度值, 重复三次取平均值, 制作标准曲线。 丙酮、 甲醇按上述同样的方法操作, 得到吸光度值, 制作标准曲线。

1.2.3 二氯甲烷的量对番茄红素含量的影响

取5个50 mL的离心管, 分别编号1, 2, 3, 4和5, 称取10 g的番茄酱置于其中, 分别加入体积为2, 3.5, 5, 7和10 mL的二氯甲烷助溶, 再用石油醚定容至刻度, 静置30 min, 吸取上层清液, 离心, 然后再用分光光度计于474 nm处测吸光度值, 利用标准曲线计算番茄红素含量, 重复以上试验5次。 另两种溶液丙酮、 甲醇按上述同样的方法操作。

1.2.4 不同浸提时间对番茄红素含量的影响

取3个50 mL的离心管, 分别编号1, 2和3, 称取10 g的番茄酱置于其中, 加入体积为2 mL的二氯甲烷助溶, 再用石油醚定容至刻度, 分别静置20, 30和40 min, 吸取上层清液, 离心, 然后再用分光光度计于474 nm处测吸光度值, 重复以上试验三次。 另外两种溶液丙酮、 甲醇按上述同样的方法操作。

番茄红素在不同溶剂中的吸收图谱见图1— 图3。 由图可以看出, 番茄红素在三种不同的溶剂中均有类似的吸收峰, 但是峰的位置略有不同, 从465~505 nm之间都有两个较大吸收峰, 其中番茄红素在石油醚中的最大吸收峰在471 nm处, 丙酮中最大吸收峰在474 nm处, 甲醇中的最大吸收峰是470 nm处。 由文献[8]报道知番茄红素最大吸收峰的波长约为472~484 nm, 文献[9]报道番茄红素在波长474 nm处有最大吸收峰, 故后面选择474 nm作为测定波长。

图1

Fig.1

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	图1 番茄红素在石油醚中的吸收图谱Fig.1 Absorption spectrum of lycopene in petroleum ether

图2

Fig.2

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	图2 番茄红素在丙酮中的吸收图谱Fig.2 Absorption spectrum of lycopene in acetone

图3

Fig.3

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	图3 番茄红素在甲醇中的吸收图谱Fig.3 Absorption spectrum of lycopene in methanol

在474 nm处测定番茄红素纯品, 以吸光度值对番茄红素浓度作图, 得番茄红素标准曲线(见图4— 图6)。 由图可知, 以石油醚为溶剂所得回归方程为Y=0.110 9X+0.022 3, R²=0.994 2; 以丙酮为溶剂所得回归方程为Y=0.104 5X+0.030 3, R²=0.982 2, 以甲醇为溶剂所得回归方程为Y=0.056 5X+0.011 9, R²=0.995 7。 三条标线浓度均在0.5~3.0 μ g· mL^-1范围内线性关系良好, 说明标准曲线准确度高, 可用来计算番茄红素含量。

图4

Fig.4

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	图4 番茄红素在石油醚中的标准曲线Fig.4 Standard curve of lycopene in petroleum ether

图5

Fig.5

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	图5 番茄红素在丙酮中的标准曲线Fig.5 Standard curve of lycopene in acetone

图6

Fig.6

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	图6 番茄红素在甲醇中的标准曲线Fig.6 Standard curve of lycopene in methanol

采用Duncan新复极差法做多重比较(见表1)可知: 以石油醚为溶剂, 在加入5 mL的二氯甲烷助溶时, 番茄红素的提取效果最显著; 以丙酮为溶剂在加入7 mL的二氯甲烷助溶时, 番茄红素的提取效果最显著; 以甲醇为溶剂在加入10 mL的二氯甲烷助溶时, 提取效果最显著, 且番茄红素的含量随着二氯甲烷的量的增加而提高。 并且无论是加入多少体积的二氯甲烷助溶, 都是以石油醚的提取效果最好。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 不同溶剂中不同二氯甲烷的量对番茄红素含量的影响 Table 1 Effect of different dichloromethane content in different solvents on Lycopene Content 二氯甲烷 的量/mL 溶剂 石油醚 丙酮 甲醇 2 91.28± 0.21e 63.49± 0.77c 33.44± 1.02d 3.5 123.57± 0.29b 77.91± 0.45b 36.86± 0.57c 5 142.14± 0.33a 76.48± 1.48b 36.96± 0.99c 7 100.83± 0.26d 90.96± 0.34a 55.99± 0.41b 10 118.04± 0.23e 62.74± 0.33c 82.19± 0.77a

表1 不同溶剂中不同二氯甲烷的量对番茄红素含量的影响 Table 1 Effect of different dichloromethane content in different solvents on Lycopene Content

采用Duncan新复极差法做多重比较见表2, 以石油醚为溶剂提取番茄红素时, 静置40 min的提取效果最显著, 以丙酮为溶剂提取番茄红素时, 静置20 min的提取效果最显著, 以甲醇为溶剂提取番茄红素时, 静置30 min的提取效果最显著, 并且随着静置时间的增加, 石油醚提取的番茄红素含量逐渐提高, 而丙酮提取的番茄红素含量逐渐降低, 甲醇提取的番茄红素含量在静置20和40 min时差异不显著。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 不同浸提时间对番茄红素含量的影响 Table 2 Effect of different extraction time on Lycopene content 时间/min 溶剂 石油醚 丙酮 甲醇 20 57.14± 0.08c 91.21± 3.45a 30.56± 0.61b 30 91.28± 0.22b 63.49± 0.78b 33.44± 1.02a 40 127.13± 2.25a 59.12± 0.31c 31.78± 0.13ab

表2 不同浸提时间对番茄红素含量的影响 Table 2 Effect of different extraction time on Lycopene content