山东省寿光市(117° 59'E, 37° 23'N)具有较大面积的蔬菜大棚种植, 是中国重要的蔬菜种植区, 保障了中国的蔬菜供应。 该地区年平均温度大约12.4 ℃, 年平均降雨量大约600 mm, 主要集中在6—9月份。 该地种植的蔬菜主要为黄瓜, 供试黄瓜品种为华北性黄瓜。 根据黄瓜大棚的建设时间, 我们选取了三个不同棚龄的黄瓜大棚: 1年、 10年和18年。

在2020年12月进行黄瓜和叶片的采集。 在每个大棚随机采集10个黄瓜和10片黄瓜叶, 65 ℃烘干后, 全部放在粉碎机进行粉碎, 均匀混合成一个样品, 一共9个黄瓜样品和9个黄瓜叶片样品。 取部分样品用小研磨机再次研磨, 过0.15 mm筛后用于测定黄瓜和叶片的碳氮含量并进行中红外光谱测定。

1.3.1 黄瓜总碳、 氮含量

称取研磨过0.15 mm筛的黄瓜样品约10 mg, 在元素分析仪(Elementar vario EL Ⅲ )测定黄瓜的总碳、 氮含量。

1.3.2 黄瓜有机组分

利用漫反射傅里叶变换中红外光谱仪(diffuse reflectance Fourier transform mid-infrared spectroscopy, FTIR)测定和分析黄瓜的各有机组分, 来表征黄瓜的品质。 将研磨过0.15 mm筛的黄瓜样品与97%的溴化钾(光谱纯)以一定的比例(黄瓜样品:溴化钾=1:80 W/W)在玛瑙研钵中研磨并混合均匀, 用压片机进行压片。 添加溴化钾的目的是减弱测定时的光散射。 首先, 测定空气的红外光谱, 从测得的样品红外光谱减去空气的红外光谱得到真正的样品红外光谱。 制得的压片在Thermo Nicolet 6700红外光谱仪(Thermo Electron Scientific Instruments Corp., Madison, WI, USA)上测定样品的透射光谱(4 000~400 cm^-1), 在4 cm^-1的分辨率下扫描64次。 红外光谱测得一些常用特征峰: 3 400 cm^-1, O—H伸缩振动以及N—H伸缩振动; 2 930和2 850 cm^-1, 脂肪族碳组分; 1 620 cm^-1, 芳香族碳组分以及NH(酰胺Ⅱ )组分; 1 545和1 515 cm^-1, 木质素结构; 1 420 cm^-1, 多糖以及蛋白质CH₂的弯曲振动; 1 370 cm^-1, 矿物; 1 050 cm^-1, 多糖或者碳水化合物^[14]。 我们选取了4个特征峰(即1 550, 1 420, 1 233和1 050 cm^-1), 计算出单个特征峰的相对峰面积(rA, %), 即相对峰面积=单个峰面积/4个特征峰的总面积。 不同的特征峰用来评估黄瓜的有机组分: 木质素组分(1 550和1 233 cm^-1)、 蛋白质组分(1 420 cm^-1)以及多糖组分(1 050 cm^-1)。

在SAS V.8.1 软件(SAS Institute Inc., Cary, NC, U.S.A)上执行单因素方差分析和LSD多重比较, 分析不同棚龄下黄瓜总碳、 氮含量, 多糖、 蛋白质以及木质素组分的变化。 线性相关分析用来评估黄瓜各组分与黄瓜总碳、 氮以及黄瓜叶片各组分之间的关系。

不同棚龄显著影响了黄瓜有机碳和总氮含量(图1)。 相对于10年和18年, 1年的蔬菜大棚黄瓜[F=46.33, p<0.001; 图1(a)]具有更高的有机碳含量。 黄瓜的总氮含量与有机碳含量的变化不同。 相对于1年和10年, 18年大棚种植的黄瓜具有更高的总氮含量[F=10.51, p=0.01; 图1(b)], 这可能归因于更长的黄瓜棚龄施用了更多的氮肥, 以保证黄瓜的产量, 导致黄瓜中较高的总氮含量^{[15, 16]}。 然而, 大量肥料的施用虽然增加了黄瓜的总氮含量, 但降低了黄瓜的总碳含量, 可能会影响黄瓜的品质。

图1

Fig.1

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	图1 蔬菜大棚棚龄对黄瓜总碳(a)和总氮(b)含量的影响Fig.1 Effects of planting year on the carbon contents (a) and nitrogen contents (b) in cucumbers

2.2.1 不同棚龄下黄瓜的红外光谱解析

黄瓜样品的红外吸收光谱(图2)显示1年、 10年以及18年棚龄大棚种植的黄瓜的红外吸收光谱并不完全吻合, 表明棚龄对黄瓜的有机组分产生了影响。 其中1 550和1 233 cm^-1为木质素组分吸收特征峰, 1 420 cm^-1为蛋白质组分吸收特征峰, 1 050 cm^-1为多糖吸收特征峰(图2)。 红外光谱以及红外光谱特征峰能反映蔬菜的品质^[7]。 多糖和蛋白质也是衡量果蔬品质的重要标准之一^{[17, 18]}。 木质素主要存在于黄瓜果皮中, 木质素在黄瓜中的含量会影响黄瓜的食用口感^[19]。

图2

Fig.2

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	图2 不同棚龄大棚种植的黄瓜的光谱Fig.2 Mid-IR spectra of cucumbers growing in the greenhouses with different planting years

2.2.2 不同棚龄下黄瓜多糖、 蛋白质和木质素组分相对含量的变化

不同棚龄显著影响了黄瓜多糖、 蛋白质和木质素组分的相对含量(图3)。 黄瓜的多糖相对含量在3个棚龄呈现先增加后降低, 10年棚龄的黄瓜的多糖相对含量显著高于1年和18年[F=5.39, p<0.05; 图3(a)]。 高的多糖在一定程度反映高的黄瓜品质。 新的大棚黄瓜品质偏低, 随着棚龄的增加, 黄瓜的品质在提升, 可以归因于逐渐稳定的土壤性质^{[20, 21]}。 另外, 随着黄瓜棚龄的继续增加, 黄瓜品质开始降低, 可能由于土壤质量的下降(如土壤中具有更多的线虫、 土壤酸化等)^[22]。

图3

Fig.3

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	图3 不同棚龄对黄瓜多糖(a)、 蛋白质(b) 和木质素(c)组分相对含量的影响Fig.3 Effects of planting years on the relative contents of polysaccharide (a), protein (b), and lignin (c) in cucumbers

随着棚龄的增长, 黄瓜蛋白质组分的相对含量变化趋势为先增高后降低。 10年棚龄的黄瓜蛋白质组分的相对含量显著高于1年和18年的黄瓜蛋白质组分的相对含量[F=17.46, p<0.01; 图3(b)]。 虽然黄瓜中蛋白质的含量相对较少, 但蔬菜中蛋白质含量的增加能指示蔬菜具有高的营养价值。 10年棚龄的黄瓜含有更高的蛋白质组分, 表明合适的棚龄有利于黄瓜品质和营养价值的提高。

1年棚龄的黄瓜木质素组分的相对含量显著低于10年和18年的黄瓜木质素组分的相对含量[F=20.67, p<0.01; 图3(c)]。 黄瓜的木质素组分主要集中于黄瓜皮中, 较高的木质素含量会影响黄瓜果实的口感。 因此, 较长棚龄的黄瓜, 在食用的时候建议削去黄瓜表皮, 增强其食用口感。

2.2.3 黄瓜有机组分间的比值对棚龄的响应

黄瓜中各有机组分的比值能综合反映不同棚龄下黄瓜的品质。 多糖和蛋白质组分的比值可以表征黄瓜中碳水化合物和营养物质之间的均衡, 多糖与木质素组分的比值能指示黄瓜的口感。 相对于1年和10年棚龄种植的黄瓜, 18年棚龄种植的黄瓜多糖和蛋白质组分的比值以及多糖与木质素组分的比值具有降低的趋势(图4)。 表明, 更长时间的蔬菜大棚抑制了黄瓜的品质, 可能归因于低的土壤质量。 较高的棚龄会导致土壤pH和有机质的降低、 但氮磷等元素的增加, 致使土壤营养的失衡^[23], 进而会导致蔬菜品质的下降。

图4

Fig.4

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	图4 不同棚龄对黄瓜多糖组分/蛋白质组分(a)和多糖组分/木质素组分(b)的影响Fig.4 Effects of planting years on polysaccharide/protein (a) and polysaccharide/lignin components (b) in vegetable cucumbers

2.2.4 不同棚龄下黄瓜叶片中多糖、 蛋白质和木质素组分相对含量的变化

不同棚龄导致黄瓜叶片中多糖、 蛋白质和木质素组分的相对含量发生显著改变(表1)。 1年棚龄种植的黄瓜叶片的多糖组分相对含量高于10年和18年棚龄(F=7.89, p=0.02); 10年棚龄的黄瓜叶片蛋白质组分的相对含量显著高于1年和18年的蛋白质组分的相对含量(F=5.73, p=0.04); 另外, 1年棚龄的黄瓜叶片木质素组分的相对含量显著低于10年和18年的木质素组分相对含量(F=14.83, p<0.01)。 以前的研究分析了蔬菜棚龄与植株生长发育间的关系, 发现叶片数、 株高以及叶面积随着棚龄的增长出现先高后低的趋势, 叶片中可溶性糖和可溶性蛋白质随着棚龄的增加也表现出先高后低的变化规律^[4]。 植物叶片是植物的重要营养器官, 是进行光合作用的主要部位^{[24, 25]}, 因此, 黄瓜叶片的特性和有机组分会影响黄瓜的产量并反映黄瓜的品质。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 蔬菜大棚棚龄对黄瓜叶片多糖、 木质素和蛋白质组分的影响 Table 1 Effects of planting years on the relative contents of polysaccharide, protein, and lignin components in cucumber leaves 黄瓜叶片 有机组分 棚龄 统计值 1年 10年 18年 F p 多糖组分/% 24.23± 0.29a 21.14± 0.22b 22.77± 0.88ab 7.89 0.02 蛋白质组分/% 14.75± 0.17ab 16.12± 0.50b 13.90± 0.62a 5.73 0.04 木质素组分/% 10.34± 0.30b 12.24± 0.14a 12.02± 0.33a 14.83 <0.01 注: 不同的上标字母表征显著性差异(p<0.05) Note: Different superscript letters in the same row indicate significant differences at p<0.05

表1 蔬菜大棚棚龄对黄瓜叶片多糖、 木质素和蛋白质组分的影响 Table 1 Effects of planting years on the relative contents of polysaccharide, protein, and lignin components in cucumber leaves

2.3.1 黄瓜有机组分与黄瓜叶片有机组分之间的关系

通过分析不同棚龄的黄瓜有机组分与黄瓜叶片有机组分间的相关性, 探究黄瓜叶片是否能反映黄瓜品质(图5)。 在不同棚龄的蔬菜大棚中, 黄瓜的多糖组分与黄瓜叶片的多糖组分之间的相关性不大[R²=0.08, p>0.05; 图5(a)]; 黄瓜蛋白质组分与黄瓜叶片蛋白质组分之间存在显著的正相关[R²=0.48, p=0.04; 图5(b)]; 黄瓜木质素组分也存在显著正相关[R²=0.80, p<0.01; 图5(c)]。 黄瓜有机组分与黄瓜叶片有机组分间的相关性结果表明黄瓜叶片在一定程度上能反映黄瓜果实的营养成分以及黄瓜果实的口感。

图5

Fig.5

	Figure Option ViewDownloadNew Window
	图5 黄瓜有机组分与黄瓜叶片有机组分间的关系 (a): 多糖组分相关性; (b): 蛋白质组分相关性; (c): 木质素组分相关性Fig.5 Linear regression between organic components in cucumber and in cucumber leaf (a): Polysaccharide; (b): Protein; (c): Lignin components

2.3.2 黄瓜有机组分间的比值与其总碳、 氮含量间的关系

线性回归分析的结果显示, 不同棚龄下黄瓜多糖与木质素组分的比值与其碳含量之间没有相关性[R²=0.06, p>0.05; 图6(a)], 表明黄瓜有机碳含量的变化可能不会影响黄瓜的品质和口感。 另外, 黄瓜多糖和蛋白质组分的比值与其总氮含量呈显著负相关[R²=0.64, p=0.01; 图6(b)], 表明黄瓜总氮含量的增加能提高黄瓜的营养价值。

图6

Fig.6

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	图6 黄瓜有机组分间的比值与其总碳、 氮含量间的关系 (a): 黄瓜多糖组分与木质素组分的比值与黄瓜总碳含量的相关性; (b): 黄瓜多糖组分与蛋白质组分的比值与黄瓜总氮含量的相关性Fig.6 Linear regressions between the ratio of cucumber organic components and the contents of carbon and nitrogen in cucumbers (a): Polysaccharide/lignin with carbon content; (b): Polysaccharide/protein with nitrogen content